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魔物を統べて世界支配を企んでいた魔王は、勇者とその一行に討たれた。それによって魔物達は統率を欠き、世界にはひとまずの平和が訪れた。それから時は流れ……。勇者の仲間だった者同士の息子『アドゥルス』が、冒険者育成施設『スパルティア』へと入った。更に時を同じくして、勇者の娘も育成施設へ。アドゥルスは、彼女や他の訓練生達と交流を深めながら、日々の訓練を乗り越えていく。その様子に、人々は、新たな世代が作るだろう英雄譚に胸躍らせていた。だが……。「まさか勇者の娘がいるとは、予想外だな……」アドゥルスの中に潜む影。……それは、かつて討たれたはずの魔王。勇者の仲間にいた女の腹の中にいた胎児（アドゥルス）に、魔王は死ぬ間際、その魂を移したのだ。だがそのせいで力は失われ、夜しか彼の意識を乗っ取って行動する事が出来なかった。「だが、やる事は変わらない。女達を犯し、力を手に入れる……」我が身の復活と勇者への復讐のため、魔王は行動を開始する……。

「強く生きろよ」という、お兄ちゃんとの約束を勘違いして番長になってしまった365人の妹達が番長として身につけた知識や習慣に振り回されつつも、お兄ちゃんに好かれようと女の子らしくなったり、ときには番長同士のガチンコバトルを繰り広げたりしながら、お兄ちゃんにとっての一番の妹を目指そうとするハチャメチャでコミカルな学園ラブコメディ！◆セールスポイント?番長モードと妹モードとのギャップ萌え　硬派な番長ヒロインたちが主人公だけに見せる女の子モード！　デートの時には恥じらいつつも可愛らしい格好をしてみたり、手を握っただけで顔を真っ赤にしてアタフタしたり、番長モードと妹モードでのギャップが見所です！?番長ならではの個性的なキャラ性、ストーリー展開　特攻服やメリケンサックが最大級のオシャレだと思い込んでいたり、可愛い服を着て町内一周することが妹番長界におけるケジメ行為だったり、番長世界で生きてきたからこその「価値観」や「純粋さ」を、各ヒロインの魅力や物語のコミカルさに結びつけます！?365人の妹を活かした作品作り　番長服姿の妹たちが365人全員集合する一枚絵など、『365人の妹』という本作ならではの要素を、先ずはビジュアルで押し出せればと考えております。　また、モブの妹達にも立ち絵や顔グラフィックを多数用意してハーレム感を演出し、同時に男キャラを排除することで、安心していちゃラブに没頭できる世界観を構築します！?さらに進化したLive2D　全ての立ち絵に、目パチ、口パク、アイドリング（呼吸）を導入。　メインヒロインにはモーションもつけることで、女の子の生きた可愛らしさを表現します！　また本作では、番長モードと女の子モードそれぞれに専用モーションを用意することで、動きの面でもヒロインの変化にメリハリをつけます！?着衣エロ・コスチュームエロ　エッチシーンを盛り上げる要素として、服を着たままのエッチを全シーンに完備！　メイド服を着たままのエッチなど、番長服とのギャップによって可愛さを引き立たせるのが狙いです。　また、ニットの縦セーターを着たままでパイズリ、黒ストッキングはもちろん脱がさない、ブラウスは第二、第三ボタンだけ開けておっぱいポロリなど、着衣エロには徹底的にこだわります。

真鈴ヶ崎の町にある『池添薬品工場』で起こった事件が、本作の物語の中心。主人公である小笠瑠璃は真鈴ヶ崎純真学園の学生。ある日、学校からの帰り道、見たこともない虫（蟲）が池添薬品工場に入っていくのを見てしまう。新種の蟲かもしれないと探索に乗り出す瑠璃だが、忍び込んだ先の薬品工場は、異形の蟲が徘徊する危険な空間だった……。